胎儿在母体子宫内基本上是无菌环境中生长，直至出生各种有益微生物才逐步定植在新生儿的各个系统，并成为伴随人类一生的有益微生物，因此人类从呱呱坠地的那个瞬间即开始了益生菌与致病菌之间的斗争，而在这个过程中各种生态因子对于有益微生物的最初建群直至最终达到生态平衡起着决定性的作用，因此研究呼吸系统正常微生物的早期定植，了解其建群和种群演替过程对于人们认识各种生态因子在呼吸系统生态平衡建立过程中的作用有着重大的意义，将有利于认知维持呼吸系统的生态平衡的必备条件，防止人类因微生物平衡失调引起的咽炎、鼻炎、气管炎、支气管炎甚至龋齿、口腔黏膜病、牙周病等感染性疾病的发生。内蒙古医学院附属医院就新生儿呼吸系统微生物的建群过程进行了初步的研究，旨在确定不同生态因子在人类呼吸系统正常微生物菌群建群、演替直至最终达到生态平衡的过程中所起的作用，并根据其这些作用对早期正确合理地养育新生儿、强化生态因子某个阶段对于建群的有益作用提供合理的指导方针。

1 对象和方法

1.1 材料来源

样本来源于2004年10月～2006月10月间内蒙古医学院附属医院产科，选择足月生产、无任何家族遗传病及感染性疾病、发育正常的健康新生儿及其母亲，共37例，其中冬春季18例，夏秋季19例；顺产24例，剖腹产13例；胎膜早破者8例，正常产前破水29例；母乳喂养者26例，人工喂养者11例；参加每日游泳训练者12例，不参加者25例。在出生当时采集1份咽部标本，以后对纳入研究的37例新生儿隔1d采集1次咽部标本为期1周，并在出生第28天采集一次月龄标本。收集前半小时不进食，于晨起婴儿洗澡时采样。

1.2 采样与培养

1.2.1 阴道拭子

用浙江拱东医用塑料厂生产的无菌采样拭子(浙食药监械准字2005第号)在产妇临产后按常规消毒外阴，窥阴器暴露后穹隆蘸取分泌物并立即放入1ml的脑心浸液中送检。

1.2.2 新生儿咽拭子

用上述标准无菌采样拭子擦拭婴儿咽后壁，注意不要触及唇、舌、牙龈等处。取后立即放入1ml的脑心浸液中送检。

1.3 培养

将上述样本原液3μl接种到哥伦比亚羊血琼脂、哥伦比亚巧克力琼脂和斯氏琼脂上，用接种环铺满90mm平皿，分别放在有氧、CO2及厌氧环境下生长，35℃，18～72h,每18h记录1次，厌氧菌培养采用产气袋法，72h后观察记录。

1.4 鉴定

1.4.1 形态学鉴定

取出培养基观察各培养基上菌落生长情况，将不同形态特点的单个菌落取出涂片，革兰氏染色，镜检观察菌体形态。

1.4.2 生化鉴定

将典型菌落形态和菌体形态的单个菌落进行细菌鉴定，采用API标准化的细菌生化和免疫凝集方法，致病菌药敏实验选择API推荐的K-B纸片法。

2 检测结果分析

2.1 剖宫产与自然顺产

本次研究对象37例，其中正常顺产组24例，剖腹产13例；其呼吸道微生物检测结果如表1。

表1 生产方式与新生儿咽部微生物检出率(%)Table 1 Way of delivery and percentage of pharyngal microbiota types detected among healthy neonates检出细菌种类Detectedtypesofbacteria剖宫产组(13例)Caesareanbirth(13cases)顺产组(24例)Normalbirth(24cases)顺产母亲阴道(24例)Vaginaofnormalbirth(24cases)粪链球菌S．facealis07例(29．16%)8例(33．33%)表皮葡萄球菌S．epidermidis08例(33．33%)9例(37．5%)粪球菌Enterococcus02例(8．33%)4例(16．67%)白色念珠菌C．albicans003例(12．5%)金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus001例(4．167%)变形杆菌S．proteus01例(4．167%)4例(16．67%)埃希氏大肠杆菌Escherichiacoli09例(37．5%)24例(100%)

从表1可以看出母亲阴道对新生儿出生时咽部存在的微生物起着决定性的作用,因为最初出现在咽腔的微生物全部是母体阴道的正常菌群,而无菌状态下剖宫产娩出的新生儿口咽部无任何微生物生长,但是这种顺产娩出时带给新生儿的细菌如粪链球菌、埃希氏大肠杆菌等毕竟不是人类咽腔应该有的微生物，终究要被咽部正常菌所替代，正常人咽粘膜菌群丰度和密度4～5个菌属，6～9个菌种，以α溶血性链球菌群、奈瑟菌属、棒状杆菌属、葡萄球菌属、厌氧链球菌群和梭杆菌属为主，月龄儿的呼吸道细菌组成就已基本达到正常成人水平[1]。

2.2 母乳喂养与人工喂养

本次研究对象37例，母乳喂养者26例，因母乳不足补充其它乳类即混合喂养9例，完全人工喂养者2例，将混合喂养9例划入人工喂养组共11例，结果见表2。